和厚朴酚通过Wnt/β-连环蛋白通路抗动脉粥样硬化

来源：中华高血压杂志2022年第2期北京时间：

作者：詹萍, 熊尚全, 柴大军, 蔡宏达,

摘要：目的 体内外观察和厚朴酚（HNK）对动脉粥样硬化（AS）模型Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路及动脉硬化的影响；探讨和厚朴酚调控Wnt/β-catenin信号通路对AS形成过程影响的可能机制。方法 动物实验：8只SD大鼠作为正常对照组，24只高脂喂养SD大鼠随机分为AS组（高脂喂养+维生素D2注射建立AS模型）,AS+HNK组建立模型后HNK腹腔注射5 mg/（kg·d）,2次/d,连续8周和AS+HNK-PNU组AS+HNK组的基础上加用Wnt/β-catenin拮抗剂PNU-74654 100 mg/（kg·d）,连续8周,每组8只。检测各组血脂水平，HE染色图像分析测定胸主动脉中膜面积及血管壁厚度，免疫印迹法检测大鼠胸主动脉组织Wnt/β-catenin的蛋白表达。细胞实验：培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）及人主动脉平滑肌细胞（HA-VSMC）分为对照组、AS模型组使用20 mg/L氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）干预48 h诱导建立细胞AS模型,AS+HNK组（AS+HNK 32μmol/L干预48 h）、AS+HNK-PNU组（AS+HNK 32μmol/L+PNU-74654 50μmol/L干预48 h）;分别采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）法和Western blot法检测细胞Wnt3a和β-catenin mRNA及蛋白质表达。采用Transwell小室实验检测HA-VSMC迁移能力。结果 动物实验：与对照组相比，AS组血清三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平升高（均P<0.05）,与AS组比较，AS+HNK组和AS+HNK-PNU组血脂水平降低（P<0.05）。与对照组比较，AS组大鼠胸主动脉中膜面积及血管壁厚度增加（均P<0.01）;胸主动脉组织Wnt/β-catenin蛋白表达水平增加（P<0.05）;和厚朴酚可降低AS模型大鼠胸主动脉中膜面积及血管壁厚度和Wnt/β-catenin蛋白表达水平（P<0.05）,联合使用PNU-74654此效应下降。细胞实验：两种细胞株模型组Wnt3a及β-catenin mRNA和蛋白表达水平高于对照组；AS+HNK组的Wnt3a、β-catenin蛋白表达与mRNA相对表达量低于AS+HNK-PNU组及AS组（均P<0.05）。AS组HA-VSMC迁移能力高于对照组，AS+HNK组与AS+HNK-PNU组HA-VSMC迁移能力低于AS组（P<0.05）。结论 和厚朴酚可下调AS模型Wnt、β-catenin表达，抑制平滑肌细胞迁移，降低主动脉中膜面积和血管壁厚度；和厚朴酚改善AS的作用可能与Wnt/β-catenin信号通路有关。

关键词：和厚朴酚,Wnt蛋白,β-连环蛋白,内皮细胞,血管平滑肌细胞,迁移,大鼠,动脉粥样硬化,