姜黄素对人脊索瘤细胞系CM-319凋亡和放射敏感性影响的实验研究

来源：中华骨科杂志2021年第01期北京时间：

作者：姚杰,秦利,吴学建

单位：河南省洛阳正骨医院 (河南省骨科医院),郑州大学第一附属医院,郑州大学第一附属医院

摘要：目的 探讨姜黄素对人脊索瘤细胞系CM-319凋亡和放射敏感性的影响及作用机制。方法 体外培养CM-319细胞，分为姜黄素0 μmol/L组、姜黄素5 μmol/L组、姜黄素10 μmol/L组、姜黄素20 μmol/L组、si-NC组、si-UHRF1组、姜黄素+pcDNA组、姜黄素+pcDNA-UHRF1组，流式细胞仪检测细胞凋亡，Western Blot检测细胞中Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3和UHRF1蛋白表达，qRT-PCR检测UHRF1 mRNA表达，克隆形成实验检测CM-319细胞对放射线敏感性。结果 姜黄素0 μmol/L组CM-319细胞凋亡率7.24%±0.73%，姜黄素5、10、20 μmol/L组CM-319细胞凋亡率分别为12.61%±1.57%、18.42%±1.54%、29.37%±2.65%，差异有统计学意义（ =9.305； =19.680； =24.153，均 <0.05）；Bcl-2蛋白相对表达量为0.76±0.07，余3组分别为0.62±0.06、0.51±0.05、0.33±0.03（ =4.556； =8.719； =16.939，均 <0.05）；Bax相对表达量为0.26±0.03、0.41±0.04、0.55±0.05、0.69±0.06（ =9.000； =14.920； =19.230，均 <0.05）；Cleaved Caspase-3相对表达量为0.24±0.03、0.37±0.04、0.49±0.05、0.62±0.06（ =7.800； =12.862； =16.994，均 <0.05），UHRF1mRNA相对表达量为1.01±0.09、0.82±0.08、0.67±0.07、0.42±0.04（ =4.734； =8.946； =17.972，均 <0.05），UHRF1蛋白相对表达量为0.83±0.08、0.61±0.06、0.48±0.05、0.31±0.0（ =6.600； =11.130； =18.258，均 <0.05），且呈剂量依赖性，增敏比分别为1.433、1.708和2.183。Si-NC组CM-319细胞中UHRF1蛋白相对表达量为0.79±0.08，si-UHRF1组表达降低为0.35±0.04（ =14.758， <0.05）；CM-319细胞凋亡率分别为8.24%±0.83%和21.49%±2.11%（ =17.531， <0.05）；Bcl-2蛋白表达水平分别为0.71±0.07、0.34±0.03（ =14.575， <0.05）；Bax相对表达量为0.25±0.03、0.62±0.06（ =16.547， <0.05）；Cleaved Caspase-3相对表达量为0.23±0.03、0.58±0.05（ =18.007， <0.05），增敏比为1.727。姜黄素+pcDNA组CM-319细胞凋亡率为28.31%±3.01%，姜黄素+pcDNA-UHRF1组为13.59%±1.25%（ =13.549， <0.05）；Bcl-2相对表达量分别为0.31±0.03、0.63±0.06（ =14.311， <0.05）；Bax相对表达量分别为0.71±0.07、0.42±0.04（ =10.791， <0.05）；Cleaved Caspase-3相对表达量分别为0.65±0.05、0.38±0.04（ =12.650， <0.05），增敏比为0.539。 结论 姜黄素可诱导CM-319细胞凋亡并增强CM-319细胞的放射敏感性，其机制与下调UHRF1表达有关。

关键词：脊索瘤;姜黄素;细胞凋亡;辐射耐受性;对比研究