脂肪细胞通过TNF-α-p38 MAPK信号通路促进内皮细胞ICAM-1表达

来源：中国血液净化杂志2016年第04期北京时间：

作者：井冉 袁江姿 牟姗 戚超君 邵兴华 方炜 倪兆慧

单位：上海交通大学医学院附属仁济医院肾内科

摘要：目的血管内皮细胞功能紊乱是腹膜透析患者心血管疾病(cardiovascular disease, CVD)发生的重要原因。本研究模拟腹膜透析液的高糖环境，观察高糖作用下脂肪细胞对微血管内皮细胞细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule,ICAM-1)表达的影响，探讨腹膜透析患者内皮功能紊乱导致CVD 发生的可能机制。方法体外诱导3T3-L1 分化成为脂肪细胞。将实验所用内皮细胞分成6 组，分别是：对照组，高糖组，高渗组，对照脂肪细胞组(普通培养基培养脂肪细胞所得上清干预内皮细胞)，高糖脂肪细胞组(高糖培养脂肪细胞所得上清干预内皮细胞)及高渗脂肪细胞组(高渗培养脂肪细胞所得上清作干预内皮细胞)。细胞增殖检测试剂盒检测bEnd.3 增殖能力。酶联免疫吸附试验检测脂肪细胞高糖、高渗作用后上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)表达量的改变。Western blot 法检测脂肪细胞条件培养基对内皮细胞ICAM-1 表达量的影响，及加用丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）信号通路阻断剂SB203580 作用于内皮细胞后ICAM-1表达量的变化。结果与对照组相比，高糖培养液直接干预内皮细胞或培养脂肪细胞后干预内皮细胞均可以促进内皮细胞增殖(高糖组/对照组：1.600±0.104 比1.000±0.000，t=9.954，P=0.010；高糖脂肪细胞组/对照脂肪细胞组：1.563±0.181 比1.213±0.097，t=2.945，P=0.042)。高糖可显著促进脂肪细胞TNF-α的表达(2515.313±277.434 比788.683±167.267，t=9.232，P=0.001)。高糖培养脂肪细胞的上清显著促进内皮细胞ICAM-1 表达(1.533±0.058 比1.133 ± 0.153，t=4.243，P=0.013)，该作用可被p38 MAPK 信号通路阻断剂SB203580 部分抑制(0.850±0.111 比1.124±0.108，t=-3.053，P=0.038)。结论高糖培养脂肪细胞后，可通过TNF-α-p38 MAPK 信号通路促进内皮细胞ICAM-1 表达，可能和腹膜透析患者内皮细胞功能紊乱及CVD发生有关。

关键词：腹膜透析,脂肪细胞,内皮功能紊乱,ICAM-1,心血管疾病

基金资助：国家自然科学基金(81300612)；“十二五”国家科技支撑计划课题(2011BAI10B08)；“973”课题(2012CB517602)；国家自然科学基金(8157040263)。