内皮素-1促进人腹膜间皮细胞增殖诱导腹膜血管新生的机制

来源：中国血液净化杂志2019年第09期北京时间：

作者：朱楠, 贾洁爽, 杨满, 谷立杰, 王玲, 袁伟杰

单位：1. 上海交通大学附属第一人民医院肾内科

摘要：【摘要】目的探讨激活内皮素-1(endothelin-1,ET1)导致腹膜血管新生是腹膜损伤的一种潜在的作用机制。方法培养人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)(HMrSV5)，高糖刺激HPMCs，观察ET1 的变化；加入外源性ET1，Western blot 检测细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和E26 转录因子-1(Ets-1)磷酸化；分别使用siRNA 和封闭性抗体抑制Ets-1，通过BrdU 测定HPMC 的增殖；最后，通过小管形成实验，使用Image J 软件分析5 个随机选择的区域的总毛细管长度。结果高糖可诱导HMPC 高表达ET1(2.5%，F=5.561，P=0.036；4.25%，F=4.784，P=0.008)；外源性ET1 诱导下，HPMC 中ERK1/2 的磷酸化水平显著上调(F=66.347，P=0.026)；ERK1/2 下游的转录因子Ets- 1 表达显著升高(F=110.614，P=0.031)；阻断MEK-1 显著消除ET1 对ERK 1/2 的激活(F=56.361，P=0.006)；加入ETA和ETB受体抑制剂后，ETAR 抑制剂可明显降低Ets- 1 的表达(F=131.191，P=0.039)。ET1 可诱导HPMCs 增殖(F=4.671，P=0.046)，其可被ET1 拮抗剂减弱(F=5.329，P＜0.001；F=5.362，P＜0.001)；抗体和siRNA 介导的Ets-1 阻断具有相似的抗增殖作用(F=5.638，P＜0.001；F=4.611，P=0.007)。因此，ET1 通过ERK1/2-Ets-1 信号传导途径特异性地促进HPMCs 增殖。另外，ET1 处理的HPMsC 的条件培养基可以显著促进HPMCs 中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)产生(F=11.614，P＜0.001)和内皮细胞血管生成。结论ET1 通过ERK1/2-Ets-1 信号通路促进HPMCs 增殖，并促进VEGF 产生和内皮细胞血管生成。

关键词：腹膜透析,内皮素-1,细胞外信号调节激酶1/2,E26转录因子-1,血管内皮生长因子,血管生成

基金资助：上海交通大学医工交叉基金(项目编号：YG2016QN27)；上海市卫计委青年项目(项目编号：20164Y0234)；中华医学会临床医学科研专项资金-施维雅肾脏病青年研究与发展项目(项目编号：17010080677)；国家自然科学基金(项目编号：81800676)