永生化人甲状旁腺细胞系的建立及功能鉴定

来源：中国血液净化杂志2023年第05期北京时间：

作者：蒋 楠 李博厚 邓淑婷 袁 也 吴 琼 温似春 陈柏锡 赵泽文 彭思琪 夏郁彬 陶一鸣 刘双信

单位：510006 广州，1华南理工大学医学院

摘要：目的 建立永生化的人甲状旁腺细胞系并进行功能鉴定。 方法 采用慢病毒感染的方式将SV40(simian vacuolating virus 40,SV40)大T抗原导入细胞，转染后用嘌呤霉素筛选转染成功的细胞。通过细胞形态学、实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)及免疫荧光检测转染后传代甲状旁腺细胞表达甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)、钙敏感受体(calcium sensitive receptor,CaSR)和神经胶质细胞缺失因子2(glial cells missing homolog 2,GCM2)mRNA及蛋白的表达情况。通过细胞增殖实验检测转染的细胞对Ca2+的反应性。 结果 转染成功的甲状旁腺细胞传代后大部分呈梭形，细胞核椭圆形，胞浆均质透明；RT-qPCR结果显示甲状旁腺细胞表达CaSR、GCM2以及PTH mRNA；免疫荧光显示永生化的甲状旁腺细胞系表达甲状旁腺相关蛋白CaSR、GCM2以及PTH。细胞增殖实验显示低钙能够促进甲状旁腺细胞系增殖。 结论 本研究成功建立了永生化的甲状旁腺细胞系，为进一步探讨继发性甲状旁腺功能亢进的发病机制及治疗提供了实验基础。

关键词：继发性甲状旁腺功能亢进；甲状旁腺细胞；永生化

基金资助：国家自然基金项目(81870508,81873616,82170730)；广东省登峰计划项目(DFJH201901)；广东省自然科学基金项目(2022A1515012374,2023A1515010024)