《中国血液净化杂志》发表论文赏析
作者:陈丽婷 宋明阳 郑 可 陈 罡 李 雪梅
单位:100730 北京,1中国医学科学院北京协和医学院 北京协和医院肾内科
摘要:目的 采用“细菌计数-内毒素定量-电镜形态”多维评价体系,比较过氧乙酸、次氯酸钠、酶清洗剂、碱洗及蒸汽5种方法对透析供水管路生物膜的清除效能。 方法 在316 L不锈钢载体上建立铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa ATCC 27853)成熟生物膜模型。将样本分对照组、0.2%过氧乙酸、0.2%次氯酸钠、酶清洗剂、碱洗、热蒸汽6组处理,每组独立重复3次。处理后,采用Luria-Bertani(LB)琼脂培养基与寡营养的Reasoner's 2A(R2A)琼脂培养基检测细菌残留,计算对数减少率(log reduction value,LRV);采用动态浊度法测定内毒素LRV;并通过扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)验证物理清除效果。 结果 ①细菌去除效果:对照组LB培养基菌数为(1.37±1.10)×107 CFU/ml。各组间LB-LRV总体比较差异有统计学意义(F=64.330,P<0.001)。热蒸汽组在2种培养基中均未检出细菌(LB-LRV>7.14);过氧乙酸组与次氯酸钠组的杀菌效果与热蒸汽组相比,差异均无统计学意义(t=1.017、2.580,P=0.842、0.148)。②内毒素去除效果:对照组内毒素量为(1.14±1.05)×104 EU/ml,各处理组内毒素LRV总体比较差异有统计学意义(F=10.480,P=0.001)。热蒸汽组清除效能(LRV=2.23)优于过氧乙酸组(t=4.571,P=0.007)、酶清洗剂组(t=4.636,P=0.006)及碱洗组(t=5.171,P=0.003)。③电镜形态:过氧乙酸组、次氯酸钠组和热蒸汽组可见生物膜碎片;过氧乙酸组可见细菌皱缩但基质残留;酶清洗剂组与碱洗组仍见大量完整细菌或细胞聚集。 结论 去除生物膜5组方法中,蒸汽组在杀菌、去内毒素与物理剥离上都优于其他组,次氯酸钠在有效杀灭细菌的同时,呈现出较好的内毒素清除与基质剥离趋势,达到次优。单一酶清洗剂和碱洗消毒对生物膜去除效果差。虽然部分消毒方法在细菌检测结果方面达到透析用水质控标准,但5种单一消毒方法去除生物膜内毒素均未达到透析用水标准。
关键词:血液透析;生物膜;细菌计数;内毒素;扫描电镜