甲基转移酶样3对巨核细胞系花生四烯酸代谢通路的影响和机制

来源：中国心血管杂志2025年第02期北京时间：

作者：张嘉祺,刘雯雯,王茜婷,陈夏欢,刘梅林

摘要：目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)对人成巨核细胞白血病细胞(MEG-01)花生四烯酸(AA)代谢通路的影响和相关机制。方法构建METTL3差异表达的MEG-01，分为正常对照(Blank)组、METTL3过表达(OE)组和过表达阴性对照(OE-NC)组、METTL3敲低(KD)组和敲低阴性对照(KD-NC)组。采用定量聚合酶链反应(qPCR)法和免疫印迹(Westernblot)法检测各组METTL3、YTH结构域家族蛋白(YTHDF1、YTHDF2)以及参与AA代谢的关键基因前列腺素内过氧化物合酶1/环氧合酶-1(PTGS1/COX-1)、前列腺素内过氧化物合酶2/环氧合酶-2(PTGS2/COX-2)、血栓素A合酶1(TBXAS1)、前列腺素I合酶(PTGIS)和前列腺素I受体(PTGIR)的表达量变化。采用酶联免疫吸附分析(ELISA)法测定细胞培养上清中AA代谢产物前列腺素H(PGH)和血栓素B(TXB)的水平。采用蛋白稳定性实验和RNA结合蛋白质免疫沉淀(RIP)实验验证YTHDF1与COX-1mRNA的结合情况。结果qPCR和Westernblot检测显示，OE组YTHDF1、PTGS1/COX-1的mRNA和蛋白水平较OE-NC组升高，KD组较KD-NC组降低(均为<0.05)。ELISA测定显示，细胞培养上清中OE组PGH、TXB的含量高于OE-NC组，KD组TXB的含量低于KD-NC组(均为<0.05)。蛋白稳定性实验和RIP实验证实，METTL3通过YTHDF1参与COX-1mRNA的翻译调控。结论METTL3可能通过促进N6-甲基腺苷(m6A)修饰介导的COX-1mRNA翻译效率，调控巨核细胞系的AA代谢通路。

关键词：甲基转移酶样3;N6-甲基腺苷甲基化;MEG-01细胞;花生四烯酸;心血管疾病

基金资助：北大百度基金资助项目2019BD019