《中国心血管杂志》发表论文赏析

巨噬细胞ABCG1介导的氧化固醇外流的研究

来源:中国心血管杂志2021年第02期北京时间:

作者:刘平原,沈思琪,武燕翔,陈连凤,严晓伟

摘要:目的测定巨噬细胞ABCG1介导的氧化固醇外流情况。方法利用1基因小干扰RNA慢病毒表达载体感染THP-1细胞,经有限稀释法筛选出敲低单克隆稳转株;用PMA诱导THP-1为巨噬细胞,ox-LDL(50μg/ml)刺激24h后,通过液相色谱串联质谱测定细胞氧化固醇7β-羟基胆固醇(7β-OHC)和7-酮基胆固醇(7-KC)外流情况。结果对待测样品进行了氧化固醇定性与定量分析,发现与无外流接受体的空白对照组相比,诱导氧化型胆固醇外流率增加(7-KC:28.6%±2.3%比4.1%±0.7%,<0.001;7β-OHC:35.5%±5.7%比3.7%±1.1%,<0.001)。与阴性对照组相比,ABCG1敲低组氧化型胆固醇的外流率降低(7-KC:16.1%±3.1%比24.7%±2.3%,<0.05;7β-OHC:15.7%±0.7%比33.1%±3.7%,<0.001)。胞内氧化固醇沉积量通过细胞总蛋白进行校正,结果显示,与对照组比较,ABCG1低表达巨噬细胞胞内氧化固醇沉积增加[7-KC:(6.61±1.28)μg/mg比(2.13±0.08)μg/mg,<0.05;7β-OHC:(1.61±0.51)μg/mg比(0.65±0.20)μg/mg,<0.05]。结论巨噬细胞ABCG1低表达可抑制氧化固醇7β-OHC及7-KC外流,增加胞内氧化固醇沉积。

关键词:动脉粥样硬化;巨噬细胞;ABCG1氧化固醇

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