Let-7f靶向抑制A20表达在血管内皮细胞炎症反应中的作用研究

来源：中国心血管杂志2020年第08期北京时间：

作者：侯江厚,姚颖杰,詹晓燕,杨奕梅

摘要：目的观察let-7f在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导血管内皮细胞炎症反应过程中的变化规律，探讨let-7f参与动脉粥样硬化起始发病过程的分子机制。方法采用双抗体夹心ELISA方法观察不同剂量ox-LDL处理血管内皮细胞时细胞间粘附分子1(ICAM-1)的表达变化情况，RT-qPCR检测不同剂量ox-LDL处理血管内皮细胞时let-7f的表达变化规律，Westernblot法分析不同剂量ox-LDL处理血管内皮细胞时核因子κB(NF-κB)的核移位情况和ox-LDL对人脐静脉内皮细胞A20表达及NF-κB通路活化的影响，双荧光素酶报告实验检测let-7f与A20基因的3’-UTR靶向结合，Westernblot法检测let-7f对A20表达的调控。结果20μg/mlox-LDL可导致血管内皮细胞培养液中ICAM-1的含量明显升高，血管内皮细胞let-7f的表达明显上调(均为<0.05)，且随着ox-LDL作用剂量的增加，ICAM-1与let-7f的表达变化均呈现明显的剂量效应关系。此外，20μg/mlox-LDL可导致血管内皮细胞NF-κB向核内移位，随着ox-LDL作用剂量的增加核内NF-κB明显增多(<0.05)。100μg/mlox-LDL作用于血管内皮细胞，可引起A20下调，IKK被磷酸化，并进一步导致NF-κB磷酸化增多，而let-7f能够与A20基因的3’-UTR靶向结合并明显抑制其表达。结论Let-7f可能通过调控NF-κB信号传导通路的活化参与血管内皮细胞的炎症反应过程，提示let-7f可能成为动脉粥样硬化早期预防和治疗的新靶点。

关键词：动脉粥样硬化;氧化低密度脂蛋白;人脐静脉内皮细胞;Let-7f;胞间粘附分子1