MicroRNA-21及其靶基因程序性细胞死亡因子4在动脉粥样硬化中的作用

来源：中国心血管杂志2017年第06期北京时间：

作者：朱晓彤,张圣洁,梁雪,李广平

摘要：目的探讨microRNA(miR)-21及其靶基因程序性细胞死亡因子4(PDCD4)在动脉粥样硬化(AS)发生发展中的作用。方法收集38例急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者及34例非冠心病患者的血浆，实时定量PCR检测miR-21的表达水平。在Lipo3000的介导下，将miR-21类似物、抑制剂及沉默PDCD4(siPDCD4)分别转染鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞，并用氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)与细胞共同孵育，设立空白对照组(未转染且未加ox-LDL)及ox-LDL组(仅加ox-LDL)。采用油红O染色检测细胞泡沫化程度，实时定量PCR及Westernblot分别检测泡沫细胞中miR-21及PDCD4蛋白水平。此外，建立ApoE小鼠AS模型20只，按随机数字表法分为3组：单纯高脂喂养组6只、过表达miR-21组7只及阴性对照组(NC，7只)，鼠尾静脉注射胆固醇包裹的miR-21激动剂(agomiR-21)及阴性对照agomiR-NC分别建立过表达miR-21组及NC组。选用正常饲料喂养的C57BL/6小鼠作为正常对照组。实时定量PCR检测miR-21在AS斑块及正常动脉组织中的表达；Westernblot及免疫组化分别检测PDCD4蛋白水平。结果与相应的对照组比较，miR-21在STEMI患者血浆、泡沫细胞及单纯高脂喂养ApoE小鼠斑块组织中的表达水平均明显升高(<0.001；<0.01；<0.01)；泡沫细胞及单纯高脂喂养ApoE小鼠斑块内PDCD4蛋白水平明显增多；与ox-LDL组比较，ox-LDL＋miR-21类似物组及ox-LDL＋siPDCD4组巨噬细胞泡沫化程度明显下降，ox-LDL＋miR-21抑制剂组细胞泡沫化程度明显增加。过表达miR-21组AS斑块内PDCD4蛋白水平较NC组明显减少，且斑块较NC组明显减小。结论miR-21在急性STEMI患者血浆中、泡沫细胞及AS斑块内的水平明显升高。过表达miR-21及沉默PDCD4可抑制巨噬细胞向泡沫细胞的转化，这与动物组织实验结果一致，表明miR-21或可靶向调控PDCD4的表达，从而发挥抗AS的作用。

关键词：microRNA-21;程序性细胞死亡因子4;动脉粥样硬化;急性ST段抬高型心肌梗死;泡沫细胞