硫氧还蛋白对血管内皮细胞Nox2通路调控的研究

来源：中国心血管杂志2016年第06期北京时间：

作者：陈北冬,赵革新,赵艳阳,陈坤,鲍利,齐若梅

摘要：目的探讨动脉粥样硬化发生发展中硫氧还蛋白(Trx)对NADPH氧化酶Nox2亚型的调控作用及机制。方法应用腺病毒感染的方法，在原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)建立高表达硫氧还蛋白(Ad-Trx)及其对照(Ad-GFP)的细胞模型，将致动脉粥样硬化重要危险因子氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)作为刺激剂，应用免疫印迹法检测Nox2、Rac1的表达及Akt的磷酸化；用免疫印记及免疫荧光的方法检验Trx在内皮细胞中的蛋白表达水平；DCFH-DA法检测细胞内活性氧(ROS)水平；提取细胞膜组织，用酶学方法测定内皮细胞NADPH氧化酶的活性。结果免疫印记结果显示腺病毒感染在内皮细胞中成功上调了Trx的表达，与对照组相比上调了3.3倍(<0.01)。与对照组相比，过表达Trx明显下调了ox-LDL刺激下内皮细胞Nox2、Rac1及p-Akt的表达(分别下调了31.5%、23.8%和20.8%，均为<0.05)，抑制了ox-LDL诱导的ROS增加(25.3%，＝0.0247)及NADPH氧化酶活性增加(32.6%，＝0.004)。结论过表达Trx通过减少ox-LDL刺激下内皮细胞Nox2、Nox2结合蛋白Rac1的表达及Nox2下游信号分子Akt的磷酸化，抑制了内皮细胞Nox2通路的过度活化及氧化应激，减轻炎症损伤，保护内皮细胞功能。

关键词：动脉粥样硬化;硫氧还蛋白;Nox2;Rac1;血管内皮细胞

基金资助：国家自然科学基金面上项目81270854