猪腺病毒3型Hexon蛋白多克隆抗体制备与免疫活性鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第1期北京时间：

作者：汪镇南, 唐青海, 颜爱, 刘云福

单位：1. 中国农业大学动物医学院, 北京 100193;2. 湖南九鼎集团兽药公司兽医中心, 岳阳 414000;3. 南阳师范学院南阳市兽医生物工程技术研究中心, 南阳 473061

摘要：本研究旨在制备猪腺病毒3型(PADV-3)Hexon蛋白多克隆抗体.试验构建重组原核表达载体pET28a-Hexon,IPTG诱导重组蛋白的表达并进行Western blotting鉴定,目的蛋白与佐剂混合、乳化制备免疫原,免疫家兔制备Hexon蛋白多克隆抗体.采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测抗体的免疫活性与抗体滴度.结果显示,Hexon蛋白原核表达以包涵体形式存在,分子质量约为105 ku;真核细胞表达的Hexon蛋白均定位于HEK293细胞质内,细胞核内无分布;IPMA测定所制备的多克隆抗体滴度为1:1 600,该抗体与体外培养的PADV-3及稳定表达Hexon蛋白的细胞均呈特异性反应.结果表明本试验制备的PADV-3型Hexon蛋白多克隆抗体免疫活性和特异性良好.

关键词：猪腺病毒3型;Hexon基因')">Hexon基因;多克隆抗体

基金资助：国家自然基金青年基金(31101837);河南省重点科技攻关项目(142102110101);南阳师范学院引进人才专项项目(70640)