肺炎克雷伯氏菌强毒株的分离鉴定及16-23S rRNA ITS序列分析

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第2期北京时间：

作者：李富祥, 李华春, 赵德宏, 王娟, 姚俊, 廖德芳, 熊和丽, 宋建领, 胡骑

单位：云南省畜牧兽医科学院, 昆明 650224

摘要：为确诊疑似仔猪肺炎克雷伯氏菌(K.pneumonia)感染,并研究其病原的致病性、耐药性、16-23S rRNA ITS系统进化特征,本研究从云南因肺炎、腹泻而大量死亡的仔猪中分离到1株革兰氏阴性短粗杆菌,命名为KP14013,对其进行生化鉴定、16S rRNA鉴定,研究其对小白鼠和仔猪的致病性,并对其16-23S rRNA ITS基因进行测序和遗传进化分析。结果显示,KP14013分离株生化特征与肺炎克雷伯氏菌相符,其16S rRNA与GenBank中23株肺炎克雷伯氏菌代表株之间的同源性均为99%,将KP14013鉴定为肺炎克雷伯氏菌。KP14013对小白鼠半数致死量(LD50)为3×101.8 CFU,腹腔注射3×108 CFU可使仔猪100%致死。16-23S rRNA ITS系统进化关系结果表明,KP14013与GenBank中收录的15株肺炎克雷伯氏菌形成进化树的一个分支,属于同一个亚群,它们之间的核苷酸同源性为98.4%~99.2%。本研究证实了肺炎克雷伯氏菌是该起仔猪腹泻大量死亡的病原;KP14013分离株为毒力极强菌株,具有多重耐药性,其16-23S rRNA ITS与GenBank中收录的肺炎克雷伯氏菌代表株之间核苷酸存在差异,可用于肺炎克雷伯氏菌菌株间的鉴别。

关键词：肺炎克雷伯氏菌;分离;致病性;16SrRNA;16-23SrRNAITS

基金资助：云南省重大科技专项(2012ZA017);云南省农业科技创新工程(2008LA019);云南省现代农业生猪产业技术体系建设项目(云财教[2013]160号)