猪圆环病毒2型Cap全基因的克隆与原核表达

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第2期北京时间：

作者：李海花, 覃尧, 张全红, 李秀丽

单位：1. 天津市畜牧兽医研究所, 天津 300384;2. 中国农业大学动物医学院, 北京 100193;3. 国家知识产权局专利局专利审查协作北京中心, 北京 100190

摘要：Cap蛋白是猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)的主要结构蛋白,能诱导免疫保护,是临床上利用血清学诊断PCV2的主要依据。本研究根据PCV2 TJ株全基因核苷酸序列(GenBank登录号:KC751546)设计特异性引物,利用PCR从PCV2 TJ株扩增获得Cap全基因,将该基因片段连接到原核表达载体pET-32a(+)中,获得重组质粒pET32a-Cap,经IPTG诱导获得约48 ku的重组融合蛋白,Western blotting分析结果表明其与小鼠抗6×His单克隆抗体和PCV2阳性猪血清均呈阳性反应。本研究成功克隆Cap全基因,构建原核表达载体,并实现Cap融合蛋白的表达,这为PCV2 Cap蛋白的功能研究及诊断方法的建立和亚单位疫苗的研制奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒2型;Cap基因')">Cap基因;克隆;原核表达

基金资助：天津市农业科学院院长基金(13004)