基于钙黄绿素显色的可视化LAMP检测猪流行性腹泻病毒的研究

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第2期北京时间：

作者：汤小真, 陈露薇, 卢荣彬, 郑新添, 黄翠琴

单位：龙岩学院生命科学学院, 龙岩 364012

摘要：针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的NP基因设计1套环介导等温扩增(LAMP)引物,在反应体系中添加钙黄绿素/氯化锰指示剂代替传统的反应后添加SYBR Green Ⅰ染料,建立了基于钙黄绿素的可视化LAMP检测PEDV的方法。该方法能在65 ℃ 1 h内特异性扩增PEDV,与猪瘟病毒(CSFV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PoRV)及大肠杆菌等均无交叉反应,检测下限为3.73 pg/μL,其结果可用肉眼判断,快捷方便。用该方法对龙岩学院动物医学研究所接诊的93份腹泻病例进行检测,结果表明,LAMP方法检测PEDV的阳性率为43.01%(40/93),高于普通PCR的检出率(38.7%,36/93)。本试验建立的可视化LAMP检测方法能用于PED诊断。

关键词：环介导等温扩增(LAMP);猪流行性腹泻病毒(PEDV);钙黄绿素;腹泻;检测

基金资助：福建省大学生创新创业训练计划项目(1127);福建省教育厅省属高校科研专项计划项目(JK2012050);福建省农业科技重点项目(2011N0025)