传染性法氏囊病病毒VP4酵母双杂交诱饵载体的构建及互作宿主细胞蛋白的筛选

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第2期北京时间：

作者：王念, 陈玉明, 张礼洲, 高立, 卢珍, 高玉龙, 王永强, 高宏雷, 刘长军, 崔红玉, 王笑梅, 祁小乐

单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所, 兽医生物技术国家重点实验室, 禽传染病研究室, 哈尔滨 150001

摘要：VP4蛋白(viral protein 4)是传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)编码的一种重要非结构蛋白,具有蛋白水解酶活性,剪切多聚蛋白pVP2-VP4-VP3释放出pVP2、VP4、VP3,对病毒蛋白成熟具有重要的作用。为了研究VP4蛋白与宿主细胞的相互作用,本研究将IBDV VP4基因克隆入pGBKT7,构建诱饵载体pGBGtVP4,自激活试验证明其无自激活活性,对酵母细胞没有毒性。运用酵母双杂交技术,从鸡胚成纤维细胞(CEF)文库中筛选VP4的互作蛋白,经初筛、测序和回转验证,获得22个候选互作宿主细胞蛋白,为深入研究IBDV VP4与宿主互作的效应和机制奠定了基础。

关键词：传染性法氏囊病病毒;VP4;酵母双杂交;诱饵载体;互作蛋白

基金资助：现代农业产业技术体系建设专项基金(nycytx-42-G3-01);国家重点实验室基本科研业务费(SKLVBP201303)