弓形虫细胞核因子3基因的克隆及序列分析

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第2期北京时间：

作者：胡玲英, 张念章, 高琦, 朱兴全, 王寿昆

单位：1. 福建农林大学动物科学学院, 福建省动物药物工程实验室, 福州 350002;2. 中国农业科学院兰州兽医研究所, 家畜疫病病原生物学国家重点实验室, 甘肃省 动物寄生虫病重点实验室, 兰州 730046;3. 华南农业大学兽医学院, 广州 510642

摘要：为研究中国特色品系荷包猪SLA-DRa基因(又称SLA-DRa-HB),本试验设计引物,RT-PCR扩增3个个体荷包猪SLA-DRa全基因编码区,并克隆至pMD18-T载体,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,经酶切鉴定后筛选阳性克隆测序,比较分析与其他SLA-DRa等位基因的差异,并绘制分子进化树。结果显示,RT-PCR成功扩增出目的基因条带,大小约800 bp。经克隆测序后分析,SLA-DRa-HB基因全长为779 bp,编码区为1-759,共编码252个氨基酸。序列对比分析结果显示,SLA-DRa-HB的特征性变异集中在135、159、202位点。而穿膜区和胞浆功能区(203-252)变异位点为206、248。分子进化树分析显示,SLA-DRa-HB自成一系,且与其他等位基因的进化关系较近。本研究成功克隆荷包猪SLA-DRa基因,为进一步研究其功能奠定基础。

关键词：弓形虫;弓形虫细胞核因子3基因;克隆;生物信息学分析

基金资助：国家自然科学基金项目(31172316);甘肃省创新研究群体计划项目(1210RJIA006);福建省教育厅科技项目(JK2011052);龙岩市科技计划项目(2012LY45)