鹿茸组织中内参基因的筛选和验证

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第4期北京时间：

作者：张然然, 刘华淼, 邢秀梅, 胡大勇

单位：1. 中国农业科学院特产研究所, 特种经济动物分子生物重点实验室, 长春 130112;2. 白城市动物卫生监督所, 白城 137000

摘要：为筛选在不同生长时期鹿茸组织中稳定表达的内参基因,试验以不同生长时期(分别为脱盘后10、20、40和60 d)的鹿茸组织为材料,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、β2-微球蛋白(B2M)、还原型辅酶Ⅰ(NADH)、60S 核糖体蛋白L40(RPL40)、谷胱甘肽还原酶7(GPx)和β肌动蛋白(ACTB)6个看家基因的表达情况,并运用 geNorm和NormFinder 两个程序综合分析6个看家基因的表达稳定性.结果显示,GAPDH、ACTB、RPL40表达稳定性较好,可用作鹿茸基因表达研究的内参基因,而NADH和GPx的稳定性最差,不适合作内参基因.通过对鹿茸生长相关基因(ANXA5、HSP27、PRD2、CRABP1、LGALS1)表达分析,进一步验证了上述结果,并且发现这5种基因均在脱盘后10 d的鹿茸组织中高表达.该研究结果为鹿茸快速生长及骨化相关基因的研究奠定了一定基础.

关键词：qRT-PCR;鹿茸;内参基因;geNorm;NormFinder

基金资助：特种动物遗传资源创新团队(CAAS-ASTIP-201X-ISAPS);吉林省科技攻关计划(20140204058NY)