伪狂犬病病毒gB蛋白抗原表位基因串联构建及原核表达

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第4期北京时间：

作者：王雨, 吉艺宽, 程艺, 向柯宇, 张宝石, 琚春梅

单位：华南农业大学兽医学院, 广州 510642

摘要：本试验通过自行设计两段引物,利用重叠延伸PCR方法,将伪狂犬病病毒(PRV)gB基因两段优势抗原表位序列串联,克隆至pMD18-T载体,测序正确后双酶切连接至pET-32a(+)载体,构建重组质粒;重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)受体菌,经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE和Western blotting检测融合蛋白表达情况.经检测,诱导后的重组蛋白获得表达,重组蛋白大小约为54 ku,其中串联蛋白大小约为34 ku.该重组蛋白可与伪狂犬病病毒gB蛋白单克隆抗体发生特异性反应,表明重组蛋白的抗原性良好.

关键词：伪狂犬病病毒;gB基因')">gB基因;抗原表位;串联基因表达

基金资助：国家自然科学基金(31001074)