重庆地区羊口疮病毒的分离鉴定及F1L基因的原核表达

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第6期北京时间：

作者：杨钰, 冯杰, 刘嫒, 张素辉, 许国洋, 冯将, 刘宗胜, 鲜思美

单位：1. 贵州大学, 贵阳 550025;2. 重庆市畜牧科学院, 重庆 402460;3. 毕节市七星关区农牧局草地中心, 毕节 551700;4. 贵州省动物疫病研究所, 贵阳 550025

摘要：本试验旨在对重庆地区羊口疮病毒(ORFV)进行分离培养及鉴定,并研究其F1L基因序列在大肠杆菌中的表达情况.利用MDBK细胞对疑似ORFV感染的羔羊痂皮中的病毒进行分离培养;对F1L基因序列进行PCR扩增,引入限制性内切酶NotⅠ和EcoRⅠ,构建重组质粒pET-32a-F1L,转化至大肠杆菌BL21菌株后,对阳性菌株进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE检测和Western blotting鉴定.结果表明,所获得的毒株为ORFV,其F1L基因在大肠杆菌中的表达产物大小约为57.4 ku,主要以包涵体形式存在,5 h为最佳诱导表达时间,并具有良好的反应原性.

关键词：羊口疮病毒;分离鉴定;F1L基因')">F1L基因;原核表达

基金资助：贵州省科学技术基金项目[黔科合J字(2010)2260];贵州省科学技术基金项目[黔科合LH字(2014)7667];重庆市农发资金项目(14423);毕节市科技局项目:贵州黑山羊羔羊口疮病防治技术攻关[毕科合字(2012)24号]