也木勒羊抑制素α亚基基因克隆及其真核表达

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第6期北京时间：

作者：黄增文, 木尔扎提, 吾热力哈孜·哈孜汗

单位：石河子大学动物科技学院, 石河子 832003

摘要：为了克隆也木勒白羊抑制素α(inhibin α,INHα)亚基基因和表达其重组蛋白质,本试验采集发情期也木勒白羊卵巢组织,并从中快速抽提总RNA,以此作为模板并根据白羊INHα亚基基因编码区序列(GenBank登录号:XM_004004955.1)设计合成1对引物,经反转录扩增获得了也木勒白羊INHα亚基基因编码区全长序列.并将扩增产物克隆到表达载体(pEGFP-N1)的Scal Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切位点之间,构建重组质粒pEGFP-INHα并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,后进行鉴定、测序,证明成功构建了INHα亚基基因的真核表达载体.将也木勒白羊INHα亚基基因与人、大猩猩、牛等动物的INHα亚基基因序列进行同源性比对分析,相似度都在50%以上,说明了抑制素基因具有高度保守性.用RT-PCR和Western blotting方法验证了INHα亚基基因的真核表达载体在BHK细胞中的成功表达及蛋白表达.

关键词：也木勒白羊;卵泡抑制素;真核表达;同源性分析

基金资助：石河子大学科学技术研究发展计划项目(gxjs2011-yz09)