猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的制备

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第7期北京时间：

作者：梁武, 孙艳, 吕茂杰, 李建丽, 杨保收, 乔健

单位：1. 中国农业大学动物医学院, 北京 100193;2. 天津瑞普生物技术股份有限公司瑞普生物研究院, 天津 300308;3. 农业部生物兽药创制重点实验室, 天津 300308

摘要：本研究利用已构建的基因工程重组菌表达猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)ORF2编码的Cap蛋白,纯化后作为免疫原,免疫8周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合。经间接免疫荧光试验(IFA)筛选及有限稀释法进行3次亚克隆后,本试验最终获得5株稳定分泌抗PCV2 Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3D12、4D5、4B9、4C9和4G10。其中4D5为IgG2b亚型,其余4株单克隆抗体均为IgG1亚型,轻链类型均为κ。Western blotting鉴定结果表明获得的5株单克隆抗体均不能特异性的识别47 ku重组PCV2 Cap蛋白;对病毒感染细胞进行IFA试验,结果显示5株单克隆抗体均特异性的识别病毒抗原,表明5株单克隆抗体识别的抗原表位均为构象表位。中和试验结果表明,5株单克隆抗体均有中和活性。本试验结果为进一步探索ORF2基因的结构、功能及建立快速准确的诊断方法奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒2型;融合蛋白;单克隆抗体

基金资助：瑞普生物研究院猪圆环病毒疫苗专项基金项目