蓝舌病病毒VP7蛋白的原核表达及免疫原性鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第8期北京时间：

作者：贾赟, 王贞钧, 孙铭英, 张雪, 张永宁, 栾慎顺, 王全凯, 孙颖杰

单位：1. 辽宁出入境检验检疫局, 大连 116000;2. 吉林农业大学, 长春 130000;3. 中国检验检疫科学研究院, 北京 100176;4. 四川出入境检验检疫局, 成都 610000

摘要：为获得蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)25型的VP7原核表达蛋白,本试验以蓝舌病病毒重组质粒为模板,PCR扩增VP7基因,将其克隆于pET-24b(+)表达载体中,获得pET-24b-BTV-VP7重组质粒。经酶切和测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3)受体菌,IPTG诱导表达His-BTV-VP7蛋白。在变性条件下用镍亲和层析柱纯化His-BTV-VP7蛋白,经Western blotting及ELISA鉴定其免疫原性。结果显示,His-BTV-VP7蛋白以包涵体形式表达,大小约为40 ku;Western blotting和ELISA检测此原核表达蛋白能与山羊阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫原性。本研究为后续建立蛋白芯片检测方法奠定了基础。

关键词：蓝舌病病毒;原核表达;Westernblotting;ELISA

基金资助："十二五"国家科技支撑计划项目(2013BAD12B01);国家自然科学基金项目(41276174)