同时检测贝类派琴虫和包纳米虫的双重LAMP方法的建立

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第8期北京时间：

作者：王彩霞, 冯春燕, 王巧黎, 袁向芬, 邓俊花, 吕继洲, 吴绍强

单位：1. 中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所, 北京 100029;2. 青岛市中心医疗集团, 青岛 266005

摘要：为满足贝类寄生虫快速检测需求,本研究根据GenBank中发布的派琴虫ITS序列和包纳米虫18S rRNA序列的保守区域分别设计LAMP扩增引物,分别建立了两种寄生虫的单重LAMP检测方法,进一步对反应体系进行优化,组装成两种寄生虫的双重LAMP方法,同时还进行了特异性检测和敏感性检测,并通过对扩增产物进行限制性内切酶酶切检验双重LAMP方法的准确性。结果表明本研究建立的贝类寄生虫双重LAMP方法具有较好的特异性,检测派琴虫时的最低检测限为10拷贝/μL质粒DNA,检测包纳米虫时的最低检测限为100拷贝/μL质粒DNA,同时酶切试验也验证了双重LAMP检测结果的准确性。对随机采自东海和黄海的20份菲律宾蛤仔和10份美国进口牡蛎的检测结果显示,该双重LAMP方法在口岸检疫工作中可以作为派琴虫和包纳米虫的快速检测方法。

关键词：贝类寄生虫病;环介导等温扩增反应(LAMP);检测;派琴虫;包纳米虫

基金资助：国家质检公益项目(201210018);国家科技支撑计划课题(2012BAK11B04)