奶牛腐蹄病坏死杆菌分离鉴定及白细胞毒素基因lktA1序列分析

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第9期北京时间：

作者：高晶, 李春秋, 姚爽, 张立春, 王欣宇, 王志慧, 赵喜文, 魏姗, 王恩雨, 孙东波, 武瑞, 郭东华

单位：黑龙江八一农垦大学动物科技学院, 大庆 163319

摘要：为分离纯化奶牛腐蹄病坏死杆菌,分析其与其他菌株的亲缘关系,本研究利用坏死杆菌白细胞毒素特异性引物,对奶牛腐蹄病病牛蹄部拭子样品进行了PCR检测,利用厌氧培养基对PCR检测阳性样品进行了坏死杆菌的分离培养,以分离的坏死杆菌基因组DNA为模板,对白细胞毒素基因进行了克隆和序列分析。结果显示,9份奶牛腐蹄病病牛蹄部拭子样品PCR检测结果均为阳性,对其中一份样品中的坏死杆菌进行分离培养,获得了纯培养物,命名为bFR13-1。坏死杆菌bFR13-1菌株白细胞毒素基因测序结果显示,与GenBank已发表的H05、A25和B35菌株的白细胞毒素基因在核苷酸水平的同源性分别为98.40%、98.35%和90.79%,推导氨基酸的同源性分别为97.7%、97.6%和89.0%。进化树分析结果显示,坏死杆菌bFR13-1菌株白细胞毒素与H05菌株的同源性最高,bFR13-1菌株与H05菌株和A25菌株呈较近亲缘关系。结果表明,不同坏死杆菌分离株的白细胞毒素呈现一定的变异性,这种变化是否与坏死杆菌致病性相关,值得深入研究。

关键词：奶牛腐蹄病;坏死杆菌;白细胞毒素

基金资助：黑龙江省高校青年学术骨干计划(1253G003)