新疆地区4种猪病多重PCR检测方法的建立与初步应用

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第10期北京时间：

作者：张勋, 吴鹏, 李世震, 伏寅峰, 许追, 梁田, 杨素芳, 陈新凯, 齐亚银, 盛金良

单位：1. 石河子大学动物科技学院, 基础兽医学重点实验室, 石河子 832003;2. 石河子市第八师142团兽医站, 石河子 932029;3. 石河子市第八师136团, 石河子 834018

摘要：本试验旨在建立一种可同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)、猪伪狂犬病病毒(porcine pseudorabies virus,PRV)、猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mh)的多重PCR检测方法。参考相关文献合成PRRSV、PCV2、PRV、Mh的特异性引物,通过对反应条件优化、特异性、敏感性测定,建立了可同时检测以上4种猪多发传染病的PCR诊断方法。扩增的片段长度分别为424 bp (PRRSV)、490 bp (PCV2)、298 bp (PRV)和360 bp (Mh),对其他常见猪病病原无特异性扩增,采用Multiplex PCR Master Mix对PRRSV、PCV2、PRV、Mh的核酸最低检出量为3个拷贝。采用多重PCR方法对60份临床样本反复检测,与单重PCR相比,4种病原符合率均为100%。结果表明,建立的多重PCR诊断方法可用于猪群中上述4种病原的单一或混合感染的快速鉴别诊断和流行病学调查。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒;猪圆环病毒2型;猪伪狂犬病病毒;猪肺炎支原体;多重PCR;检测

基金资助：绵羊新抗微生物多肽基因的筛选、酵母表达及抗性分析(30960276);新疆不同品种绵羊抗菌肽NK-Lysin多态性与抗肿瘤活性关系研究(31360589)