牛分枝杆菌Mb1230基因的表达纯化及其活性评价

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第10期北京时间：

作者：李明, 贾红, 鑫婷, 郭晓宇, 袁维锋, 侯邵华, 侯强, 高新桃, 吴竞, 董瑞凯, 杨宏军, 刘来兴, 朱鸿飞

单位：1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193;2. 山东省农业科学院奶牛研究中心, 济南 250183

摘要：为了探究牛分枝杆菌Mb1230蛋白在牛结核病诊断中的应用价值,本试验利用PCR方法扩增出Mb1230基因,构建重组质粒pET-22b-Mb1230,经IPTG诱导表达后用亲和层析纯化重组蛋白,通过结核菌素皮内变态反应试验(TST试验)、IFN-γ释放试验(IGRA试验)和间接ELISA对重组蛋白的活性进行评价。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,重组蛋白大小与理论值相符,且能与鼠抗His的抗体反应有特异性条带;在TST试验、IGRA试验和间接ELISA中也表现出抗原活性。结果表明,重组Mb1230蛋白具有良好的B细胞活性和T细胞活性,在牛结核病诊断中具有应用潜力。

关键词：牛分枝杆菌;Mb1230;原核表达;牛结核病诊断

基金资助：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2014ywf-zd-1)