鸭源新城疫病毒F基因在昆虫细胞中的表达和鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第11期北京时间：

作者：王安平, 朱善元, 王永娟, 吴双, 左伟勇, 洪伟鸣

单位：江苏农牧科技职业学院, 江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室, 泰州 225300

摘要：为在昆虫细胞中表达鸭源新城疫病毒(NDV) F蛋白,本试验首先根据鸭源NDV F基因序列设计引物,PCR扩增出F基因,将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac1,获得重组转座载体pFastBac-F,将其转化到大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-F,在脂质体介导下转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBac-F。Western blotting、间接免疫荧光试验结果均显示表达的重组蛋白能与鸭抗NDV阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。结果表明鸭源NDV F蛋白在昆虫细胞中获得了成功表达,为鸭新城疫的预防控制奠定了基础。

关键词：鸭源新城疫病毒;F基因')">F基因;昆虫细胞;表达

基金资助：国家自然科学基金项目(31302096);江苏省农业支撑项目(BE2013415);江苏省"六大人才高峰项目"(NY-009)