枯草芽孢杆菌JNB001蛋白酶特性的研究

来源：中国畜牧兽医杂志2015年第12期北京时间：

作者：余全法, 吴劲松, 竺礼斌, 王海霞, 曲道峰, 韩剑众

单位：1. 宁波市畜牧兽医局, 宁波 315012;2. 宁波市逸然畜牧有限公司, 宁波 315466;3. 浙江工商大学食品质量与安全系, 浙江省食品安全重点实验室, 杭州 310018

摘要：为了解枯草芽孢杆菌JNB001发酵所产蛋白酶的特性,试验以蛋白酶活力为指标,研究了pH、温度等因素对酶促反应的影响,并通过水解度考察了粗酶液对各种动物蛋白的酶解效果。结果表明,酶反应最适pH为8.0,温度为45 ℃;粗酶液在pH 5.5~9.0的范围内较稳定,过碱则不利于酶液的保存。在45 ℃下热稳定性良好,超过50 ℃保温10 min后残余酶活已不足60%;金属离子Ca2+和Mg2+、还原剂DTT、表面活性剂Tween-80等能大幅度提高酶活力。而Fe2+、Cu2+、金属螯合剂EDTA、变性剂SDS等物质则会抑制蛋白酶活性;酶促反应的Km为6.43 mg/mL,Vmax为47.39 μg/min;针对不同蛋白底物,酶促反应较适pH为 7.0~9.0,温度为40~50 ℃。该粗酶液具有水解猪毛、猪蹄甲、脱毛牛皮、明胶等硬蛋白类物质的能力。上述试验结果可为枯草芽孢杆菌JNB001在病死畜禽无害化生物处理体系等方面的工业应用提供参考。

关键词：蛋白酶;酶学性质;动物蛋白;酶解效果

基金资助：宁波市科技计划重大专项(2013C11033)