蓝舌病病毒衣壳蛋白VP2、VP5、VP7酵母双杂交诱饵质粒的构建及鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第1期北京时间：

作者：张继凯, 孙恩成, 杨涛, 徐青元, 吕爽, 王海秀, 张沁, 吴东来

单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所, 兽医生物技术国家重点实验室, 农业部兽医公共卫生重点开放实验室, 哈尔滨 150001

摘要：蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)的结构主要由3层衣壳蛋白组成,其中VP2、VP5蛋白构成了BTV的外层衣壳,VP7蛋白构成了BTV的中间衣壳,最内层衣壳则由VP3蛋白构成。VP2、VP5及VP7蛋白在BTV侵染宿主细胞的过程中起着非常重要的作用。为了研究BTV与宿主细胞相互作用的分子机制,本研究将BTV的VP 2、VP 5、VP 7基因分别克隆到pGBKT7载体中,成功构建了pGBKT7-VP2、pGBKT7-VP5与pGBKT7-VP73个诱饵质粒,且通过自激活和毒性验证,证明所构建的3个质粒均无自激活作用,对酵母细胞无毒性作用。本研究为今后利用酵母双杂交筛选VP2、VP5、VP7蛋白中与宿主细胞相互作用的蛋白做好了铺垫,为深入研究BTV与宿主细胞的相互作用奠定了基础。

关键词：蓝舌病病毒;诱饵质粒;自激活作用;毒性作用

基金资助：国家自然科学基金(31302065);中国博士后科学基金(2013M540172);国家科技支撑计划(2013BAD12B05);公益性行业(农业)科研专项(201203056);新型重大动物疫苗与诊断试剂创制及生产工艺创新(2011AA10A213);中央级公益性科研院所基本科研业务费(0302015008)