K亚群禽白血病病毒gp85单因子血清的制备及其特异性鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第2期北京时间：

作者：孙鹏, 陈孜孟, 赵国梁, 崔宁, 祖铭, 崔治中, 苏帅

单位：1. 山东农业大学动物医学院, 泰安 271018;2. 山东省畜牧业贸易服务中心, 济南 250000

摘要：为了制备一种快速特异性识别K亚群禽白血病病毒(ALV-K)的单因子血清,本试验将ALV-K接种DF1细胞,提取感染细胞DNA作为模板,PCR扩增1 005 bp ALV-K-gp85和510 bp ALV-K-gp85(fragment)基因.将其正确的阅读框插入表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(Rosetta)菌株中表达.将表达蛋白常规免疫昆明白小鼠制备抗血清.结果表明成功获得39.85和22.01 ku的重组融合蛋白,且具有良好的免疫原性.间接免疫荧光试验(IFA)结果表明两血清均可与ALV-K反应,而不与ALV-A、ALV-B和ALV-J反应.本试验首次研制获得能特异性识别ALV-K的单因子血清,为K亚群禽白血病的快速检测奠定了基础.

关键词：K亚群禽白血病病毒;gp85基因')">gp85基因;表达;间接免疫荧光试验(IFA);单因子血清

基金资助：国家自然科学基金(311723309)