猪流行性腹泻病毒部分N基因的原核表达及表达产物反应原性分析

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第3期北京时间：

作者：张博, 李守军, 吕茂杰, 杨保收

单位：1. 天津农学院动物科学与动物医学学院, 天津 300384;2. 农业部生物兽药创制重点实验室, 天津 300308;3. 天津瑞普生物技术股份有限公司研究院, 天津 300308

摘要：为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)部分N蛋白的原核表达产物是否具有抗原性,并为建立PEDV的间接ELISA方法奠定基础,本试验应用RT-PCR技术扩增N基因的部分核酸序列,经克隆后将目的片段连接到原核表达载体pET-30a(+)中。重组菌于37 ℃、0.5 mmol/L IPTG诱导4 h后进行SDS-PAGE分析,并进行Western blotting鉴定。结果显示,构建的原核表达重组质粒测序正确,且该蛋白与抗血清(PEDV高免血清)具有良好的反应活性。本试验成功构建了PEDV部分N基因原核表达载体,为后续PEDV感染的血清学诊断方法的建立提供依据。

关键词：猪流行性腹泻病毒;N基因片段')">N基因片段;原核表达;反应原性

基金资助：瑞普生物研究院猪流行性腹泻疫苗专项基金项目