N-羟乙酰神经氨酸IgY抗体的制备及鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第3期北京时间：

作者：吴宗澄, 高阳, 胡盼, 李岩松, 周玉, 柳增善, 任洪林, 卢士英

单位：吉林大学人兽共患病研究所, 人兽共患病教育部重点实验室, 长春 130062

摘要：本试验旨在建立N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc) IgY抗体的制备及鉴定方法。通过碳二亚胺法将Neu5Gc和载体蛋白进行偶联,制备Neu5Gc人工完全抗原,用制备的完全抗原免疫海兰褐蛋鸡制备Neu5Gc-IgY抗体,经ELISA检测分析鉴定抗体活性。经紫外光谱扫描、琼脂糖凝胶电泳法初步判断Neu5Gc人工完全抗原制备成功,获得的特异性Neu5Gc-IgY抗体经ELISA检测分析,首次免疫后第7天产生抗体,抗体效价呈动态变化,随着免疫次数的增多,血清效价和抗体效价逐步上升,至初次免疫后63 d达到高峰,效价达1:10 000,停止加强免疫后抗体效价可持续一个月左右,1号鸡产生的IgY抗体具有很好的抗原竞争活性,获得竞争回归方程y=30.28x+16.923,线性系数R2=0.9581。以上结果表明,本试验制备的Neu5Gc IgY抗体取得了理想效果,为红肉、牛奶及肿瘤组织中Neu5Gc的检测奠定了基础。

关键词：N-羟乙酰神经氨酸;人工完全抗原;蛋鸡;IgY

基金资助：国家自然科学基金项目(31071539)