C基因型牛副流感3型病毒的分离鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第5期北京时间：

作者：冉旭华, 张峣, 曹思, 卢元赫, 张玲玲, 刘阳阳, 倪宏波, 朱战波, 闻晓波

单位：黑龙江八一农垦大学预防兽医学省重点实验室, 大庆 163319

摘要：为了对宁夏地区患有呼吸系统疾病的舍饲牛进行病原鉴定,试验主要利用RT-PCR方法对样品进行牛副流感3型病毒(BPIV3)M基因序列扩增,将扩增产物连接在pMD18-T载体后转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞中进行亚克隆。通过氨苄青霉素平板筛选,将鉴定为阳性的克隆菌进行核苷酸序列测定并利用分子生物学软件与GenBank上参考序列进行同源性比对。测序结果表明,从样品中分离到了1株BPIV3,并命名为NX49,其M基因全长为1056bp;进化分析表明,NX49隶属于BPIV3C基因型,其M基因与中国山东C型分离株SD0835具有较高同源性,核苷酸同源性为99.4%;理化分析表明,该毒株对温度、酸及有机物均敏感,高温孵育下Mg2+对该病毒无保护力;血凝试验表明,NX49对豚鼠红细胞凝集效价仅为1∶4,且仅在4℃孵育时出现凝集反应。本研究成功分离得到一株BPIV3C型毒株,这将有助于中国BPIV3分子进化规律及病毒流行特点的进一步研究。

关键词：牛副流感3型病毒;C基因型;分离;鉴定;同源性比对

基金资助：黑龙江八一农垦大学研究生创新科研项目(YJSCX2015-Y19);黑龙江省大学生创新创业训练计划项目(201510223020);"十二五"农村领域国家科技计划课题(2012BAD12B03-3);黑龙江省农垦总局"十二五"重点科技计划项目(HNK125B-11-08A、HNK125B-11-02)