单核细胞增生李斯特氏菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第6期北京时间：

作者：李丹丹, 徐义刚, 李梦圆, 王昱, 邱索平, 高会江, 高慎阳

单位：1. 海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心, 海口 570311;2. 东北农业大学动物医学学院, 哈尔滨 150001;3. 从化出入境检验检疫局, 从化 510900;4. 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心, 重庆 404100;5. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 牛遗传育种研究室, 北京 100193;6. 辽宁医学院畜牧兽医学院, 锦州 121001

摘要：为建立单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)的快速检测方法,本研究以LM iap基因为靶基因设计合成引物及TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR快速检测LM的方法。结果显示,对15株试验菌株进行实时荧光定量PCR检测,只有LM菌株检测为阳性,表明该检测方法特异性强;该方法的灵敏度为6.5 CFU/mL;稳定性和重复性试验结果表明,同一样品重复检测4次Ct值的变异系数均小于2%;利用该检测方法对采集的139份样品进行检测,共计检出3份LM阳性样品,与国标法(GB 478930-2010)检测结果一致。该检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,具有良好的实用性。

关键词：单核细胞增生李斯特菌;iap基因')">iap基因;实时荧光定量PCR

基金资助：海南省社会发展科技专项(2015SF29);国家质检总局科技项目(2013IK031、2013IK051、2015IK089);重庆市科技计划项目(cstc2014yykfA80017);海南省应用技术研究与开发专项项目(ZDXM20130025);广东检验检疫局科技计划项目(2011GDK44、2013GDK04)