猪圆环病毒2型CAP蛋白在flashBAC杆状病毒表达系统中的表达与鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第7期北京时间：

作者：郭慧娟, 樊翠, 张英, 吕茂杰, 梁武, 杨保收

单位：1. 天津瑞普生物技术股份有限公司, 瑞普生物研究院, 天津 300308;2. 中国农业大学动物医学院, 北京 100193

摘要：试验旨在通过真核表达系统表达猪圆环病毒2型（porcine circovirus type 2，PCV2） CAP蛋白。以PCV2 TZ0601株为模板，将PCV2 CAP全基因及CAP去除信号肽的基因编码序列克隆至pOET3载体上，酶切与测序鉴定正确后，将重组质粒pOET3-CAP及pOET3-CAP-X转染sf9昆虫细胞。采用flashBAC杆状病毒表达系统表达PCV2 CAP及去除信号肽的CAP蛋白，通过间接免疫荧光法、SDS-PAGE 和Western blotting鉴定目的蛋白的表达。结果表明，真核表达质粒pOET3-CAP及pOET3-CAP-X构建成功，目的基因在sf9昆虫细胞中高效表达，得到的蛋白经SDS-PAGE和Western blotting鉴定，在25~35 ku处有蛋白条带，表达的蛋白质可被PCV2阳性血清识别。试验结果为进一步制备PCV2亚单位疫苗及诊断抗原试剂盒的研发奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒2型;flashBAC杆状病毒表达系统;CAP蛋白

基金资助：瑞普生物研究院动物疫病流行病学调查专项基金（RPBVI20130010）