绵羊卵母细胞超低温冷冻对四跨膜蛋白CD9表达的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第8期北京时间：

作者：乌丽雅苏, 乌亚罕, 史振丹, 爱伦高娃, 扎木嘎, 乌云斯钦, 恩和玛日特, 娜仁花

单位：内蒙古农业大学动物科学学院, 内蒙古自治区动物遗传育种与繁殖重点实验室, 呼和浩特 010018

摘要：试验旨在探讨不同发育时期卵泡上四跨膜蛋白CD9的表达，以及体外成熟和超低温冷冻对绵羊卵母细胞CD9的影响。采用免疫组织化学技术检测CD9蛋白在卵泡上的表达部位，实时荧光定量PCR技术检测CD9 mRNA的表达量，Western blotting技术检测CD9蛋白的含量。免疫组织化学结果发现，在绵羊原始卵泡上就开始检测到CD9荧光信号，且随着卵泡的成熟荧光信号逐渐增强，成熟卵泡时荧光信号达到最强；实时荧光定量PCR检测新鲜MⅡ期卵母细胞中CD9 mRNA的表达量显著增高（P<0.05），冷冻GV期卵母细胞CD9 mRNA的表达量最少；Western blotting检测得出新鲜MⅡ期卵母细胞中CD9蛋白表达最多，冷冻GV期卵母细胞上表达最少，与实时荧光定量PCR结果一致。卵母细胞的冷冻保存要比胚胎保存应用前景广泛，而四跨膜蛋白CD9在精卵融合中更有着重要的作用，以上结果均显示，冷冻保存降低卵母细胞四跨膜蛋白CD9含量，而CD9的损伤是受精率下降的重要原因之一。

关键词：CD9;卵巢;卵母细胞;体外成熟;免疫组化;Westernblotting;实时荧光定量PCR

基金资助：国家自然基金项目（31360547）