奶牛乳腺上皮细胞培养体系中疑似干/祖细胞的鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第8期北京时间：

作者：郝雨蒙, 赵锋, 张娜, 陈丹, 李庆章

单位：东北农业大学, 乳品科学教育部重点实验室, 哈尔滨 150030

摘要：为了揭示奶牛乳腺干细胞在体外泌乳调控中的潜在作用，本研究根据成体干细胞具有BrdU标记滞留的特点检测了奶牛乳腺上皮细胞（DCMECs）中疑似乳腺干/祖细胞，同时分析了两种新发现的乳腺干细胞分子标志（FNDC3B和PROCR）的表达定位，验证了它们指示DCMECs的可行性。通过实时荧光定量PCR方法检测分析DCMECs体外培养过程中催乳素、生长激素、胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体的基因表达变化。结果显示，连续培养25 d后BrdU标记滞留细胞比例接近0.4%，极少数细胞呈FNDC3B或PROCR阳性，可以观察到不对称分裂细胞，原代和传代后DCMECs在激素、胰岛素样生长因子及其受体mRNA水平上差异极显著（P<0.01）。总之，在非诱导泌乳分化培养条件下，脱离泌乳生理环境的DCMECs自身具有的泌乳调控基因表达迅速受到抑制，但在一定培养时间内，DCMECs群体中能够保留一定比例疑似乳腺干/祖细胞，提示这些多能奶牛乳腺干/祖细胞在体外泌乳调控和乳腺腺泡重塑过程中可能发挥重要作用。

关键词：奶牛;乳腺干/祖细胞;标记滞留;泌乳

基金资助：国家自然科学基金面上项目（31571338）；东北农业大学博士启动基金（2012RCB15）