犬细小病毒血凝抑制抗体效价胶体金免疫层析检测方法的建立及应用

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第8期北京时间：

作者：马永缨, 孙明, 申屠芬琴, 孔汉金, 杨欣艳, 秦亚嫚, 陈西钊, 贾红

单位：北京世纪元亨动物防疫技术有限公司, 北京 100094

摘要：试验旨在利用胶体金免疫层析技术建立快速检测犬血清中犬细小病毒（canine parvo virus, CPV）血凝抑制（haemagglutination inhibition, HI）抗体效价的方法，用于CPV疫苗免疫效果评价。采用双抗体夹心法，以抗CPV血凝相关抗原的单克隆抗体制备CPV抗原检测试纸条；将犬血清进行不同比例系列稀释后，分别与定量CPV抗原充分反应，滴入CPV胶体金试纸条，根据试纸条检测线（test line，T线）消失时的血清最高稀释倍数判断血清中CPV抗体的HI效价；用此方法检测86份犬血清样品，并与传统血凝抑制试验方法进行分析比较。结果显示，成功制备CPV抗原检测试纸条，确定了试纸条检测犬血清CPV-HI效价的反应条件和结果判定标准。结果表明，在检测不同稀释倍数犬血清反应后的CPV抗原时，能使试纸条T线消失时的血清最高稀释倍数与HI效价具有正相关性，犬血清最高稀释倍数乘以4即为HI效价；两种方法的符合率达90.7%。本试验初步建立了胶体金试纸条检测CPV血凝抑制效价的方法，为检测CPV-HI效价提供了一种操作简单、快速的试验方法，可用于CPV疫苗免疫效果评价。

关键词：犬细小病毒;胶体金;试纸条;血凝抑制效价

基金资助：公益性行业（农业）科研专项经费项目（201303042）