鸡传染性支气管炎病毒HH06株囊膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能检测

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第8期北京时间：

作者：白妍, 赵蕾, 杜威威, 潘龙, 黄小丹, 杨贵君, 李广兴

单位：东北农业大学动物医学学院, 哈尔滨 150030

摘要：采用RT-PCR方法扩增鸡传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus, IBV）HH06株E基因全长，经抗原性和亲水性分析，将E基因部分序列（193～327 bp）亚克隆于pET-32a（+）和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET-32a-E1转化E.coli Rosetta（DE3）感受态细胞，诱导表达获得大小约为23 ku的重组截短E1蛋白，Western blotting检测重组蛋白与IBV全病毒多克隆抗体能特异性反应。以纯化后的E1蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体，ELISA检测抗体效价达到220；Western blotting分析表明，E1多克隆抗体与重组表达蛋白具有良好的反应性；间接免疫荧光试验显示，多克隆抗体可检测到PVAX-E1转染Hela细胞表达的E1蛋白和感染鸡胚肾细胞（CEK）中的HH06株IBV，抗E蛋白多克隆抗体的制备为E蛋白功能的深入研究奠定了基础。

关键词：传染性支气管病毒;囊膜蛋白;多克隆抗体;免疫印迹试验;间接免疫荧光试验

基金资助：国家自然科学基金项目（31172295、31272569）