两种布鲁氏菌弱毒株侵染小鼠巨噬细胞过程的荧光表征及分析

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第8期北京时间：

作者：胡梦薇, 刘朋涛, 严国, 高剑峰

单位：石河子大学生命科学学院, 石河子 832003

摘要：通过对绿色荧光蛋白（GFP）布鲁氏菌弱菌株M5（GFP-M5）和S19（GFP-S19）侵染小鼠巨噬细胞（RAW264.7）及对其与胞内溶酶体、内质网、高尔基体初次结合所用时间进行测定，探讨分析两种布鲁氏菌弱毒株侵染小鼠巨噬细胞过程的荧光表征。将GFP-M5和GFP-S19分不同时间段分别侵染RAW264.7，利用激光共聚焦和流式细胞仪观察和检测。结果显示，GFP-M5和GFP-S19均构建成功。布鲁氏菌M5和S19及GFP-M5和GFP-S19侵染RAW264.7后胞内生存能力无明显差异。GFP-M5和GFP-S19侵染30 min后均已进入小鼠巨噬细胞，2 h分别到达溶酶体、内质网和高尔基体。而两种弱毒株在1、2、3、4 h与各细胞器结合率相近。流式细胞仪检测结果显示，GFP-M5和GFP-S19侵染RAW264.7的GFP+细胞含量无显著差异（P>0.05）。结果提示，两种弱毒株在侵染进入宿主细胞的初期及侵袭能力并没有明显差异。

关键词：布鲁氏菌;绿色荧光蛋白(GFP);RAW264.7;共聚焦显微镜;流式细胞仪

基金资助：国家重点基础研究发展计划（973计划）（2010CB530200）