鸡MHCⅠα和β2m链基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第8期北京时间：

作者：戴银, 胡晓苗, 赵瑞宏, 侯宏艳, 沈学怀, 潘孝成, 周学利, 张丹俊

单位：安徽省农业科学院畜牧兽医研究所, 合肥 230031

摘要：为进一步研究主要组织相容性复合体Ⅰ类（major histocompatibility complex, MHCⅠ）分子在免疫应答中的作用机制，试验经PCR克隆获得MHCⅠα和β2m链基因，随后插入带有荧光标签蛋白的真核表达载体，成功构建了重组质粒pEGFP-MHCⅠα和pmCherry-MHCⅠβ2m，并通过脂质体法转染293T真核表达细胞。荧光显微镜观察可见，MHCⅠα和β2m分子主要分布于真核细胞的内膜系统，改变了与之融合的荧光蛋白在细胞内的定位。此外，Western blotting检测可见大小约68.3和41.3 ku的目的蛋白反应带，表明重组质粒能够在293T细胞中顺利表达，且表达蛋白与鸡MHCⅠ类分子的相应抗体可发生特异性结合反应，具有良好的免疫学活性。

关键词：MHCⅠ&alpha')">鸡MHCⅠα基因;MHCⅠ&beta')">鸡MHCⅠβ2m链基因')">2m链基因;真核表达载体;293T细胞

基金资助：国家自然科学基金项目（31302044）；国家蛋鸡产业技术体系项目（CARS-41）；安徽省科技攻关项目（11010302119）