猪流行性腹泻病毒与猪伪狂犬病病毒二重RT-PCR检测方法的建立及应用

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第9期北京时间：

作者：孙彦琴, 马震原, 闫若潜, 王东方, 曹伟伟, 郭育培

单位：1. 河南省动物卫生监督所, 郑州 450008;2. 河南省动物疫病预防控制中心, 郑州 450008

摘要：为建立猪流行性腹泻病毒（PEDV）与猪伪狂犬病病毒（PRV）的快速鉴别检测方法，本研究根据GenBank已登录的PEDV膜蛋白M基因和PRV gE基因保守区域序列设计了2对特异性引物，以PRV和PEDV混合总RNA为反转录模板，初步建立了PRV和PEDV的二重RT-PCR检测方法，并进行了特异性、敏感性、重复性验证和临床应用检测。结果显示，该方法对两种病毒的最低检测限均为10 TCID50/mL病毒含量，重复性好，特异性强，可特异性地扩增PEDV和PRV细胞培养物，但对其他7种病原对照扩增不出任何条带，对26份临床疑似PEDV和PRV感染样品检测结果与测序鉴定结果完全一致。本研究成功建立了PEDV和PRV的二重RT-PCR检测方法，为临床上猪流行性腹泻和猪伪狂犬病的快速鉴别诊断提供了方法。

关键词：猪流行性腹泻病毒;猪伪狂犬病病毒;二重RT-PCR

基金资助：河南省科技攻关项目（142102310224）