猪传染性胃肠炎病毒N蛋白原核表达和间接ELISA检测方法的建立

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第9期北京时间：

作者：郭宏伟, 郑鸣, 乔宏兴, 马辉, 赵绪永, 王永芬

单位：河南牧业经济学院生物工程学院, 郑州 450046

摘要：试验构建了pET28a-TGEV-N重组表达质粒，完成TGEV N蛋白的表达和纯化，通过SDS-PAGE和Western blotting分析，表明表达产物N蛋白可被猪TGEV阳性血清识别。用TGEV N蛋白作为诊断抗原，建立了检测TGEV血清抗体的间接ELISA检测方法，该方法批内、批间重复试验变异系数均小于5%；检测血清的特异性为100%，假阳性率为0，假阴性率为5%，与7种常见猪病血清无交叉反应。针对临床血清，用该方法检测结果与中和试验结果相比，符合率为100%。该方法能够快速、有效地检出TGEV抗体，重复性和特异性好，为标准化诊断试剂盒的开发奠定了基础。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒;N蛋白;原核表达;间接ELISA

基金资助：河南省科技攻关项目（142102310034、13A230382）；校科技创新团队项目（HUAHE2015001）