特异性靶向犬细小病毒融合DNA疫苗的构建及免疫效果的研究

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第10期北京时间：

作者：吴植, 郝福星, 王永娟, 刘洋, 王栋, 徐州, 袁维峰

单位：1. 江苏农牧科技职业学院, 泰州 225300;2. 南京农业大学动物医学院, 南京 210095;3. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193

摘要：研究旨在构建特异性靶向犬细小病毒（canine parvovirus，CPV）融合DNA疫苗，探讨其诱导机体产生免疫应答的效果。试验用重组技术构建了含细胞毒性T淋巴细胞抗原-4胞外区（CTLA-4125）与犬细小病毒VP2的主要抗原表位区域（VP2228）融合表达质粒pVAX1-CTLA-4125-VP2228，同时构建了不含CTLA-4125的pVAX1-VP2228，体外转染COS-7细胞，Western blotting检测其表达产物；将pVAX1-CTLA-4125-VP2228、pVAX1-VP2228分别免疫小鼠，免疫后进行抗体水平测定和抗体亚型分析；通过淋巴细胞增殖试验和ELISA分别检测淋巴细胞刺激指数和γ-干扰素表达水平。结果显示成功构建了pVAX1-CTLA-4125-VP2228和pVAX1-VP2228，并能在COS-7细胞中正确表达；抗体检测结果显示pVAX1-CTLA-4125-VP2228免疫组抗体水平显著高于pVAX1-VP2228免疫组（P<0.05）；淋巴细胞增殖试验显示pVAX1-CTLA-4125-VP2228免疫组的刺激指数显著高于pVAX1-VP2228免疫组（P<0.05）；γ-干扰素表达水平测定显示pVAX1-CTLA-4125-VP2228免疫组极显著高于pVAX1-VP2228免疫组（P<0.01）。结果表明，CTLA-4125-VP2228融合DNA能有效增强动物对VP2228抗原的免疫应答，为进一步研究融合DNA疫苗特异性的靶向递呈机制奠定基础。

关键词：犬细小病毒;DNA疫苗;抗原递呈细胞;靶向性

基金资助：江苏农牧科技职业学院院级课题（NSFYB1302）；公益性行业（农业）科研专项经费项目（201303042）；中国农业科学院科技创新工程（ASTIP-IAS-11）