不同类型CpG基序对细粒棘球蚴Eg95抗原的免疫增强作用研究

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第10期北京时间：

作者：董瑞凯, 郭晓宇, 袁维峰, 贾红, 鑫婷, 侯绍华, 朱鸿飞

单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193

摘要：为探究不同类型CpG基序对细粒棘球蚴（Echinococus granulosus）Eg95抗原的免疫增强作用，将pET-32a-3Eg95重组大肠杆菌，经IPTG诱导表达，亲和层析纯化重组蛋白pET-32a-3Eg95。将重组蛋白分别与常规佐剂Quli-A、pUC18-CpG和CpG ODN混合制备基因工程亚单位疫苗样品，免疫小鼠。通过间接ELISA方法检测抗体水平，通过实时荧光定量PCR方法测定体外刺激试验后细胞因子的相对表达量，检测不同佐剂在体液免疫和细胞免疫方面对Eg95抗原免疫效果的增强作用。结果显示，诱导表达重组蛋白的大小约为56 ku，与理论值相符，用羊细粒棘球蚴阳性血清检测有特异性条带；pUC18-CpG组和CpG ODN组小鼠免疫后14、28、42 d的抗体平均水平（D450 nm）分别为3.10、3.03、3.22和2.98、3.12、3.27，与Quli-A组抗体平均水平相比均差异显著（P0.05）。重组蛋白刺激后pUC18-CpG组与CpG ODN组IFN-β、IFN-γ和TNF-α的相对表达量分别为6.88、2.35、6.28和5.03、2.85、7.07，与Quli-A组相比差异均显著（P<0.05）。因此相对于常规佐剂Quli-A，pUC18-CpG和CpG ODN在体液免疫和细胞免疫方面对Eg95抗原都有显著的免疫增强作用，CpG ODN的免疫增强作用略优于pUC18-CpG，二者均可作为免疫佐剂，增强现有包虫病基因工程疫苗抗原的免疫效果。

关键词：细粒棘球蚴;pUC18-CpG;CpGODN;免疫刺激活性

基金资助：国家自然科学基金（31402232）