猪ICSI胚胎制备条件的优化

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第10期北京时间：

作者：张立苹, 刘西梅, 李莉, 肖红卫, 华文君, 毕延震, 郑新民

单位：湖北省农业科学院畜牧兽医研究所, 动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室, 武汉 430064

摘要：为了进一步优化猪胞浆内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）胚胎制备条件，本试验将Piezo操作系统应用于猪ICSI胚胎制备过程中，并以胚胎各阶段存活率、分裂率和囊胚率作为衡量指标，对比Piezo操作系统与传统斜口针操作、Piezo操作条件时操作液中添加CB浓度、操作台温度及精子的不同处理方法对猪ICSI胚胎发育的影响。结果表明，Piezo操作系统可以显著提高注射卵的存活率和卵裂率（P0.05）；利用Piezo进行猪ICSI时，操作液中添加CB，可以减少显微操作时注射针卵母细胞的损伤，其中以7.5 μg/mL CB效果最佳；操作台温度30℃最适合制备猪ICSI胚胎；精子预先进行超声波断尾处理对猪ICSI胚胎的早期发育无显著影响。研究结果表明，精子预先进行超声波断尾处理后，操作液中添加7.5 μg/mL CB、操作台温度30℃，应用Piezo操作系统比较适合猪ICSI胚胎制备。

关键词：猪;胞浆内单精子注射;制备条件

基金资助：转基因生物新品种培育重大专项（2016ZX08006001-005、2016ZX08006002-006、2016ZX08010003-006）；湖北省农业科技创新中心（2016-620-000-001-027）；湖北省科技支撑计划（2014BBB010）；湖北省农科院青年基金（2014NKYJJ02、2016NKYJJ19）