猪传染性胃肠炎病毒截短S基因原核表达及免疫原性初步检测

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第10期北京时间：

作者：郑仲华, 杨佩, 赵明, 丘峰, 吴祖庆, 张仕云, 柳俏凡, 何洪洲, 洪纯丹, 魏楚丹, 赵爽, 李盼畔, 陈金顶

单位：1. 南沙出入境检验检疫局, 广州 511457;2. 华南农业大学兽医学院, 广州 510642

摘要：为监测猪场猪群中猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）抗体水平，本研究利用TGEV冻存液，通过RT-PCR扩增得到S基因的主要抗原片段B/C区约560 bp，将其酶切后连接到pET-32a载体，转化大肠杆菌BL21感受态细胞。挑取转化成功的部分菌落进行PCR试验，将目的条带正确的菌落添加到LB培养基过夜培养，提取重组质粒并送测序。培养测序正确的菌液，利用IPTG诱导蛋白表达，通过SDS-PAGE试验，在约37 ku位置有一明显的目的条带。利用自制猪传染性胃肠炎兔血清通过Western blotting试验检测纯化的重组蛋白，在37 ku处可见一条带，表明此重组蛋白具有一定的免疫原性。本研究将有助于研究TGEV ELSIA检测试剂盒的组装并进行TGEV抗体水平的监测，为猪场免疫情况提供相应参考。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒;B/C区;截短表达

基金资助：广东省省级科技计划项目（2015B020230009）