骨髓间充质干细胞为核供体的克隆绵羊的生产与鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第11期北京时间：

作者：郭园, 刘宗正, 刘乐, 孟凡华, 张焱如, 周欢敏, 刘春霞

单位：1. 内蒙古农业大学职业技术学院, 包头 014109;2. 青岛市畜牧兽医研究所, 青岛 266000;3. 内蒙古农业大学生命科学学院, 呼和浩特 010018;4. 内蒙古自治区生物制造重点实验室, 呼和浩特 010018

摘要：本研究旨在采用骨髓间充质干细胞（BMSCs）为核供体进行体细胞核移植，以获得成体干细胞克隆绵羊。选择幼体绵羊BMSCs为核供体，构建重构胚进行克隆胚胎移植，克隆绵羊诞生后，选取IASG上公布的绵羊10个微卫星标记位点，PCR扩增克隆羊、供体细胞及代孕母羊微卫星DNA，利用Quantity One软件进行基因分型，计算供体细胞与克隆羊之间的父子关系相对机会（RCP）值。结果显示，以幼体绵羊BMSCs为核供体，与去核成熟卵母细胞进行核移植，构建重构胚进行电融合，其融合率达80.62%，重构胚发育至桑椹胚阶段，经手术植入20只代孕母羊，获得克隆绵羊5只，成活3只。克隆羊基因型与供体细胞一致，供体细胞与克隆羊之间的RCP≥99.999%，证明克隆羊来自幼体绵羊BMSCs。本试验最终成功获得了首例以BMSCs为核供体的克隆绵羊。

关键词：骨髓间充质干细胞;体细胞核移植;克隆绵羊

基金资助：内蒙古自然基金重大项目（2012ZD03）；内蒙古自治区自然科学基金（2016MS0315）；内蒙古自治区高等学校科学研究项目（NJZY16066）；内蒙古农业大学生命科学学院师生协同科技创新项目