鸡生长激素在毕赤酵母中的表达、纯化和活性鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第11期北京时间：

作者：郁建锋, 何赛, 金泽楷, 周欢庆, 董小敏, 龚道清, 顾志良

单位：1. 常熟理工学院, 常熟 215500;2. 扬州大学, 扬州 225009

摘要：生长激素（growth hormone，GH）与受体结合调节靶细胞的功能在机体的生长发育及代谢过程中起着极其重要的作用。为获得高纯度具有生物学活性的鸡生长激素（chicken growth hormone，cGH），试验将C端融合了6个组氨酸的cGH成熟片段基因序列克隆入毕赤酵母表达载体pPIC9K中，使用电转法将重组质粒导入毕赤酵母GS115，以1%的甲醇诱导重组菌（GS115-pPIC9K-cGH）96 h，表达大小约为25 ku的目的蛋白cGH，经Ni离子亲和层析和聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶层析获得95%以上的cGH重组蛋白。实时荧光定量检测结果表明，纯化的cGH重组蛋白可刺激鸡肝癌细胞LMH内的胰岛素样生长因子Ⅰ（insulin-like growth factor Ⅰ，IGF-Ⅰ）基因的mRNA表达上调，表明所发酵纯化的重组蛋白cGH具有生物学活性，这为其结构和功能的研究及生产应用奠定了基础。

关键词：鸡生长激素;毕赤酵母;表达;纯化;生物学活性

基金资助：国家自然科学基金（31072025）；苏州市科技计划项目（SYN201416）